肉的宰后嫩化是指归因于肌原合成人造钎维的设计的影响，肌原合成人造钎维的设计是由内源性淀粉酶核核苷酸水解不起作用酶化学可降解肌原合成人造钎维和細胞骨架淀粉酶会造成的。与几百年来一种是关注度原点的钙淀粉酶酶有所差异，胱天淀粉酶酶（caspases）前段时间形成感好奇心来看题。胱天淀粉酶酶在細胞凋亡的制定一阶段起着至关主要的的功效，这当中caspase-3在死去淀粉酶核核苷酸水解不起作用中的的功效是多方位面和非常复杂的，因为应当进一大步科研。S-亚硝基化顺利通过改善钙产生、卡路里分解代谢、淀粉酶质化学可降解和細胞凋亡来改善口感，是指嫩度和持水力。之前科研表明S-亚硝基化都可以下降信任线粒体的caspase-3级联不起作用，这有可能是力量細胞凋亡和羊肉产品质量变的情况。caspase-3的科研特别是其与細胞凋亡的关心，殊不知，通常很少有科研一起探讨S-亚硝基化改善caspase-3的共识机制。

2024年9月由成都农业科技二本大学张万刚专家销售团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱菌物为该研究提供了亚硝基化体现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

简体中文一级标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊杂志：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202历经四年应响系数：5.7

刊发时间段：2024年9月

老客户厂家：南京农业大学

钻研材料：蛋白

拜谱保证技术设备：亚硝基化修饰组学

工艺自驾路线：

一、科研导致

01.Caspase-3抗逆性

目前为止尚不模糊不清NO对caspase-3的阻止能力是否是归因于NO介导的S-亚硝基化，不同于氨水浓度均值的GSNO当做外源性NO批售，以成脂caspase-3的身体外S-亚硝基化。后果证实，与沒有GSNO的组相对，100、200和400μM GSNO组的caspase-3催化活性氧有效降底（图1），与原本报导一样的。GSNO操作降底caspase-3催化活性氧的存在理由仍存在不足阐述。

图1 区别溶液浓度的GSNO进行处理对caspase-3生物的损害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化限度

调查探讨Caspase-3的亚硝基化状态，以展现GSNO对Caspase-3的影响性。经GSNO操作后，检查到caspase-3球蛋白S-亚硝基化效果加大（图2）。这数据证明，外源性GSNO塑造可成功创业引导caspase-3的身体之外S-亚硝基化。更让人诧异的是，在没了GSNO發生的比对组中检查到一款较弱的S-亚硝基化带，这证明caspase-3有机会發生内源性的S-亚硝基化。再者，本调查探讨中caspase-3的S-亚硝基化状态较高，而caspase-3的渗透性降，这与时候的调查探讨共同。只不过，caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化呈现位点尚不看不清楚，还必须 进步骤的探险。

图2 GSNO加工对caspase-3S-亚硝基化水准的导致

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化呈现组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的队列。白色箭头的队列表达S-亚硝基化肽，粉红色箭头的C表达S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3分解结淀粉酶

结血清用作1种为关键的癌细胞膜骨架血清，在维护肌癌细胞膜框架的框架详细其中，全部性和收宿性等方面起着为关键的作用，论述S-亚硝基化caspase-3对结血清可生物降解的铭各样还还具有为关键实际意义。与Std（未用胱天血清酶-3和GSNO孵育的起始肌纤维材料板血清）组不同于，0 μM GSNO组（肌原纤维材料板和caspase-3的孵育，无GSNO）的详细全部结血清占比的显著性削减，警告caspase-3对结血清还还具有内在的的血清水解反应本事。在GSNO孵育后，详细全部结血清的占比的显眼提高（P < 0.05）。不仅，当GSNO含铁偏高时，详细全部结血清的占比的将持续上浮（P < 0.05）（图5）。这个感觉意味着，SNO淡化的caspase-3以平均水平依靠的方式抑制作用结血清的可生物降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3溶解结核蛋白

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3生物降解肌钙血清-T

肌钙血清-T (TnT)是原肌球血清改善有担当肌肉组织收敛的丝条的需要肌原食物黏胶钎维血清。TnT的吸附功能是判断到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化的条件下，caspase-3对TnT的吸附状况长为6右图，与Std组（包含caspase-3和GSNO的肌原食物黏胶钎维）比较，caspase-3组中30 kDa TnT场面描写更为凸显增强，得出结论caspase-3参与的了TnT的吸附，虽然，caspase-3与GSNO的孵育引起30 kDa TnT越来越低。在100和200 μM GSNO组之間并没有判断到凸显的差异化(P > 0.05)，而当GSNO的浓硫酸浓度起到400 μM 时，该场面描写更为凸显减小(P < 0.05)。等等发现了得出结论了SNO呈现的caspase-3对TnT吸附的限制做用。结血清和TnT是caspase-3的过敏底物，而GSNO净化处理减少caspase-3的灵催化活性也许引起肌原食物黏胶钎维血清吸附情况减少。结合以上经验，NO引发的S-亚硝基化会完成呈现半胱氨酸残基来改善caspase-3的灵催化活性，接着进一部引响其对结血清和TnT的血清蛋白质水解力量，若想引响鸡肉高质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3光降解肌钙蛋白质-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结ppt

本的研究有何意义浅论S-亚硝基化对caspase-3绘制的危害极其其次对鸡肉片肌原人造纤维材料身体吸附的危害。核蛋清质S-亚硝基化就能够绘制caspase-3的半胱氨酸残基，因此引起caspase-3活力性缩减，进一次缓和了其对鸡肉片肌原人造纤维材料核蛋清质的核蛋清质电离性能。

三、拜谱工作小结

调查主要包括了酶活法测定，亚硝基化体现组学科研分析，WB等检则的方式，看到核球血清质S-亚硝基化应该体现caspase-3的半胱氨酸残基，这导致了caspase-3活性酶的减轻，相结的一步控制了其对鸡肉肌原化学纤维核球血清质的核球血清质血清质水解专业能力。本调查为表述核球血清质质亚硝基化对肉质地的调空规则展示 好几个个新的第一视角。

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参考价值论文资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663